米氏常数测定注意事项（米氏常数测定时的要求有哪些）

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1、 测定米氏常数时，要求在沸水浴中停止反应，然后加入NAOH。

2、 米氏常数是研究酶促反应动力学最重要的常数。

3、 其意义如下：其值等于酶促反应达到其最大速度Vm的一半时的底物浓度[S]。

4、 它可以指示酶和底物之间的亲和力。Km值越大，亲和力越弱，反之亦然。

5、 米氏常数可以决定一个代谢途径中的限速步骤：代谢途径是指由一系列彼此密切相关的生化反应组成的代谢过程，前一个反应的产物正好是后一个反应的底物，如EMP途径。

6、 限速步骤是一个代谢途径中最慢的步骤，也就是Km值最大的步骤。这种酶也被称为该途径的关键酶，可以用来判断该酶的最适底物。

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